。難于看清其形態(tài).更談不上識(shí)別其細(xì)微結(jié)構(gòu)
。所以.微生物細(xì)胞需要經(jīng)過(guò)染色后,借助染料的反襯才能
把菌體和背景區(qū)分開(kāi)
,從而能在顯微鏡下進(jìn)行觀察
。微生物學(xué)發(fā)展到現(xiàn)在,已形成很多染色技術(shù)
,這些技術(shù)除能對(duì)菌體染色外
,還能對(duì)細(xì)胞內(nèi)
部或外部的細(xì)微結(jié)構(gòu)進(jìn)行染色,染色技術(shù)已成為微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的較基本技術(shù)之一
。
染色的基本原理
微生物染色的基本原理是根據(jù)微生物菌體和染料的特性
,通過(guò)物理(細(xì)胞和細(xì)胞物質(zhì)對(duì)染料的毛細(xì)管現(xiàn)象、滲透作用和吸附作用等)和化學(xué)
因素(細(xì)胞物質(zhì)和染料的化學(xué)性質(zhì)不同而發(fā)生各種各樣的化學(xué)反應(yīng))的相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的
。酸性物質(zhì)對(duì)于堿性染料吸附力較強(qiáng).吸附作用穩(wěn)固
,
如酸性的胞核對(duì)于堿性染料就易于吸附;同理
,堿性物質(zhì)吸附酸性染料能力強(qiáng)
。如果要使酸性物質(zhì)染上酸性材料.必須改變它們的物理狀態(tài)(
比如細(xì)胞的pH)才利于吸附作用;反之
,堿性物質(zhì)(如細(xì)胞質(zhì))通常僅能染上酸性染料
,若把它們變?yōu)檫m宜的物理形式,也同樣能與堿性染料發(fā)
生吸附作用
。
細(xì)菌的等電點(diǎn)較低
,pH為2~5,而目前常用的培養(yǎng)基一般為中性
、堿性或弱酸性
。微生物在這些培養(yǎng)基中生長(zhǎng)后菌體蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電
荷,而堿性染料電離時(shí)染料離子帶正電荷.帶負(fù)電荷的細(xì)菌常和帶正電荷的堿性染料進(jìn)行結(jié)合
。因此
,在細(xì)菌學(xué)上常用堿性染料對(duì)細(xì)菌菌體進(jìn)
行染色。